一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠视网膜神经节细胞（Mouse Retinal Ganglion Cells）
- 细胞别称：RGC；视网膜神经节细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
- 组织来源：视网膜组织（神经节细胞层分离纯化）
- 生长特性：贴壁生长（需特定基质包被培养器皿）
- 细胞形态：典型神经元形态，胞体呈多极或双极，轴突延伸明显
- 细胞代数：原代细胞（P0 - P2，建议实验使用原代或低代次细胞）
- 细胞规格：5×10^4 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：视网膜神经节细胞专用培养基（含神经营养因子及低浓度血清）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：神经细胞专用冻存液（含DMSO及抗氧化剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：原代细胞增殖能力有限，建议直接用于实验
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于临床或活体移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭外表面，静置培养箱1小时恢复代谢
- 传代标准：原代细胞不建议传代（如需扩增，融合度达70% - 80%时操作）
- 传代比例：原代细胞建议直接铺板使用，扩增时按1:1比例接种
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含DNase抑制剂）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打终止消化
- 注意事项：
- 避免机械损伤（神经元轴突易断裂）
- 培养基需含BDNF、CNTF等神经营养因子维持活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：神经细胞专用冻存液（含5% DMSO及凋亡抑制剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→转入液氮
- 复苏验证：
- 复苏后48小时进行Calcein - AM/PI双染检测存活率（≥80%）
- 功能验证：轴突生长能力检测（接种后72小时观察延伸情况）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 2. 7天内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测结果）
- 3. 细胞复苏后存活率低于80%（需提供染色图片及计数数据）
- 4. 免疫荧光标记鉴定与描述不符（需提供实验证据）
- 不予重发情形：
- 1. 未使用配套培养基或神经营养添加剂
- 2. 解冻后静置培养超过48小时未换液
- 3. 原代细胞反复冻融或传代超过P3代
- 4. 未按规范进行轴突活性检测直接开展实验
（注：以上操作均需在生物安全二级实验室内完成，建议使用前阅读相关文献优化实验方案。）
