一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠视网膜小胶质细胞
- 细胞别称：视网膜微胶质细胞、视网膜驻留免疫细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
- 组织来源：视网膜组织
- 生长特性：贴壁生长（需特定基质包被培养器皿）
- 细胞形态：静息状态下呈分支状，激活后转为阿米巴样
- 细胞代数：原代细胞（P1 - P3代，建议使用前3代以保证功能特性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：DMEM/F12基础培养基（含10% FBS + 小胶质细胞激活抑制剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含5% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~72 - 96小时（与培养状态及激活程度相关）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入预热的培养基低速离心去冻存液
- 培养瓶：酒精擦拭表面后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每5 - 7天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（接种密度建议3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含钙离子螯合剂）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后轻柔拍打分离
- 注意事项：
- 避免机械吹打过度（防止激活小胶质细胞）
- 传代后48小时内避免换液以维持细胞稳态
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清专用冻存液（含5% DMSO及能量代谢底物）
- 细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 1小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞活力（台盼蓝染色存活率≥85%）
- 功能验证：脂多糖刺激后TNF - α分泌检测（P2代细胞需呈现剂量依赖性响应）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控截图）
- 7日内经qPCR确认支原体污染
- 复苏后细胞贴壁率低于70%（需提供明场显微照片）
- 流式检测CD11b/Iba1阳性率＜90%
- 不予重发情形：
- 解冻后超72小时未进行换液操作
- 自行添加细胞因子导致异常激活
- 使用非防紫外线培养器皿引起光损伤
- 未按规范进行免疫荧光标记前处理
