一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠鼻腔粘膜上皮细胞
- 细胞别称:NMEC;鼻腔上皮细胞;鼻粘膜细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无呼吸道疾病史)
- 组织来源:鼻腔粘膜组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被基质)
- 细胞形态:单层铺展后呈多边形或鳞状,接触抑制后形成紧密连接
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Epithelial Cell Medium(含2% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(依赖培养密度与基质条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入4mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后,静置于培养箱2小时平衡温湿度
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含低浓度Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
- 注意事项:
- 避免机械刮取损伤细胞基底膜结构
- 传代后6小时内更换新鲜培养基以维持黏液分泌功能
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期存储
- 复苏验证:
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率(标准≥90%)
- 功能验证:黏液染色或纤毛运动活性检测(P5代细胞应保持生理特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供干冰残留证明)
- 3日内确认支原体/真菌污染(需提供荧光定量PCR报告)
- 复苏存活率低于90%(台盼蓝染色法复检)
- 物种鉴定与描述不符(STR比对结果存疑)
- 不予重发情形:
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用非指定培养基导致细胞去分化
- 未按规范进行梯度降温直接冻存
- 未定期检测支原体引发交叉污染
(注:本产品经原代分离及严格质控,适用于呼吸道屏障功能、病原体感染模型等研究领域。)