一、细胞基本属性
细胞名称
小鼠巩膜成纤维细胞（Mouse Scleral Fibroblasts）
细胞别称
Scleral Fibroblasts；巩膜基质细胞；巩膜纤维母细胞
种属来源
小鼠（Mus musculus）
年龄性别
健康成年小鼠（性别不限，供体经筛选无眼部疾病史）
组织来源
巩膜组织（经胶原酶分离纯化）
生长特性
贴壁生长（依赖纤维连接蛋白包被培养器皿）
细胞形态
长梭形或星形，融合后呈平行束状排列
细胞代数
P3 - P8（确保细胞功能稳定及低传代遗传保真性）
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
成纤维细胞专用培养基（含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+成纤维生长因子）
培养条件
气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
倍增时间
~24 - 48小时（受细胞密度及培养基批次影响）
供应限制
仅限科学研究使用，不可用于临床治疗或活体移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管：37℃水浴快速解冻后，离心去除冻存液，加入5mL预热完全培养基重悬
• 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置于培养箱中1小时适应温湿度
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例
1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法
• 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含酚红指示剂）
• 37℃消化30 - 60秒，轻拍培养瓶壁促使细胞脱落
注意事项
• 严格控制消化时间（避免细胞外基质过度降解）
• 传代后6小时内避免移动培养瓶以保证贴壁稳定性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 消化后离心去除胰酶，缓慢滴加预冷冻存液重悬
• 程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证
• 复苏后12小时检测细胞贴壁率（合格标准≥85%）
• 功能验证：Ⅰ型胶原分泌量检测（P5代细胞应维持基质合成能力）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度追踪报告）
2. 7天内证实真菌/支原体污染（需提供第三方检测报告）
3. 复苏后贴壁率低于80%（需提供相差显微镜观察影像）
4. 细胞种属鉴定与描述不符
不予重发情形
1. 未按规范进行预包膜处理导致细胞贴壁失败
2. 擅自更改培养基成分影响细胞功能
3. 液氮保存容器未定期补液导致细胞受损
4. 实验操作污染未及时反馈
