一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠巩膜上皮细胞(Mouse Scleral Epithelial Cells)
- 细胞别称:MSCEpiC;巩膜上皮细胞;眼部上皮细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无眼部疾病史)
- 组织来源:巩膜组织(眼球外层纤维膜)
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质支撑)
- 细胞形态:单层铺展,融合后呈扁平多角形,边缘清晰
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:上皮细胞专用培养基(含5% FBS及上皮生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(与接种密度及培养基条件相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精消毒表面后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶-EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化1 - 3分钟,镜下观察细胞间隙扩大后终止
- 注意事项:
- 避免消化过度损伤细胞膜完整性
- 首次换液需在传代后12小时内,以去除残余酶类
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(标准≥90%)
- 功能验证:细胞角蛋白免疫荧光染色(P5代细胞应维持上皮特异性标记表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 收到后72小时内证实微生物污染(需提交检测报告)
- 细胞存活率低于85%(台盼蓝染色法)
- 种属鉴定结果与无种属鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形:
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用非指定培养基或培养条件不当
- 多次冻融导致细胞损伤
- 未按规范进行细胞特性验证即开展实验
注:本产品仅供科学研究,操作需遵守实验室生物安全规范