一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠角膜内皮细胞（Mouse Corneal Endothelial Cells）
- 细胞别称：MCEC；角膜内皮细胞；CEC
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
- 组织来源：角膜内皮层组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：规则六边形单层排列，接触抑制后呈紧密镶嵌结构
- 细胞代数：P3 - P8（经功能验证，确保细胞活性和屏障特性稳定）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：专用内皮细胞培养基（含5% FBS +角膜内皮细胞生长因子及抗生素）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存（-196℃）
- 倍增时间：约48 - 72小时（受细胞密度及培养条件影响）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入3mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后，静置于培养箱1小时恢复
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3天观察一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液）
- 37℃消化30 - 60秒，显微镜下确认细胞间隙扩大后终止
- 注意事项：
- 严格控制消化时间（避免紧密连接结构损伤）
- 首次换液在传代后12小时内完成，去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后轻柔重悬细胞于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时检测存活率（台盼蓝拒染率≥90%）
- 功能验证：ZO - 1免疫荧光染色确认细胞间连接完整性
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录证明）
- 72小时内证实真菌/细菌污染（需提供污染检测图像）
- 细胞存活率低于承诺值（以第三方检测报告为准）
- 种属鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形：
- 收货后未按规范立即复苏或传代
- 自行修改培养基配方导致功能异常
- 反复冻融或离心转速过高损伤细胞
- 未按要求进行定期支原体筛查
（注：以上操作均需在二级生物安全柜内完成，建议使用原代细胞专用培养耗材）
