一、细胞基本属性
细胞名称：小鼠鼓膜上皮干细胞
细胞别称：MTESC；鼓膜上皮前体细胞；耳膜基底干细胞
种属来源：小鼠（Mus musculus）
年龄性别：健康成年鼠（性别混合，供体经耳科检查无感染史）
组织来源：鼓膜上皮基底细胞层
生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：单层铺展呈多边形，高核质比，边缘清晰
细胞代数：P3 - P10（经端粒酶活性检测确认增殖潜能）
细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶 或0.5mL冻存管（含专用无血清冻存液）
培养基：Epithelial Stem Cell Medium（含5% FBS+表皮生长因子+Wnt信号通路激活剂）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无动物源冻存液（含植物源冰晶抑制剂），液氮气相长期保存
倍增时间：约24 - 48小时（与培养密度及生长因子浓度相关）
供应限制：仅用于基础研究，不可应用于药物开发或人体移植
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管复苏需37℃水浴轻摇解冻，加入3mL预温培养基低速离心（200g×5min）后接种；培养瓶运输需静置30分钟后补加1mL新鲜培养基。
传代标准：融合度达80% - 85%时传代（避免接触抑制导致分化倾向）
传代比例：1:2分瓶（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25%胰酶 - 胶原酶混合消化液（含1mM钙离子）；
37℃消化3 - 5分钟，通过轻拍培养瓶促使细胞脱落，立即用含血清培养基终止反应。
注意事项：
维持低氧环境（3% O₂）可增强干细胞特性；
传代后需静置12小时再移动培养瓶以防止细胞移位。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清干细胞专用冻存液（含5% DMSO+海藻糖）
细胞密度：冻存浓度1.2×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
预冷程序降温盒（-1℃/min速率）至 - 80℃过夜；
次日转移至液氮罐气相层长期保存。
复苏验证：
复苏后48小时进行ALDH1活性检测（阳性率需≥85%）；
分化潜能检测：连续培养14天后应维持CK14阳性表达率＞90%。
四、售后服务承诺
重发标准：
1.物流温度记录仪显示超温≥10分钟（需提供原始数据）
2.到货7天内经流式检测CD326阳性率＜80%
3.细胞活率低于85%（Calcein - AM/PI双染法）
4.核型分析显示异常染色体≥3处
不予重发情形：
1.使用非低氧培养条件导致分化
2.未按时更换培养基引发自发分化（＞72小时未换液）
3.机械刮除法传代造成物理损伤
4.未按规范进行细胞特性鉴定（如未做角蛋白免疫荧光）
