一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠口腔黏膜上皮细胞(Mouse Oral Mucosal Epithelial Cells)
- 细胞别称:MOEpiC;口腔上皮细胞;黏膜上皮细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,无口腔疾病史)
- 组织来源:口腔黏膜组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原或纤维连接蛋白包被)
- 细胞形态:单层铺展,接触抑制后呈多边形或“铺路石样”排列
- 细胞代数:P3 - P6(维持上皮细胞分化特性及屏障功能)
- 细胞规格:5×10^4 cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Epithelial Cell Medium(含1% FBS+上皮细胞生长因子添加剂,含EGF、BPE等)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), -150℃以下长期保存
- 倍增时间:约36 - 60小时(与细胞密度及培养条件相关)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入3mL预温培养基轻柔混匀后离心重悬;
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置于培养箱1小时适应环境。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:4(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA);37℃消化1 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项:
- 避免消化过度(防止细胞间紧密连接破坏);
- 传代后12 - 18小时首次换液,清除残留酶及碎片。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO、20% FBS及渗透保护剂)。
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液;梯度降温:4℃ 30分钟→ -20℃ 1小时→ -80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后48小时内检测存活率(台盼蓝染色法≥85%);
- 功能验证:角蛋白免疫荧光染色(P3代细胞应表达特异性角蛋白标记)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 物流温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明);
- 收到后48小时内证实微生物污染(需提供检测结果);
- 复苏存活率低于80%(需提供染色图像及计数结果);
- 物种鉴定与描述不符(需提供STR分析报告)。
- 不予重发情形:
- 未按说明书要求进行预包被或使用非指定培养基;
- 细胞解冻后静置超过48小时未处理;
- 传代次数超过推荐代数导致功能异常;
- 未按要求进行定期支原体检测。