一、细胞基本属性
细胞名称
小鼠牙周膜干细胞(Mouse Periodontal Ligament Stem Cells)
细胞别称
mPDLSCs;牙周膜间充质干细胞;牙周膜祖细胞
种属来源
小鼠(Mus musculus)
年龄性别
健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无口腔疾病史)
组织来源
牙周膜组织(通过机械分离与酶消化法获取)
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
细胞形态
长梭形或多角形,呈现典型间充质干细胞形态
细胞代数
P3 - P10(维持干性标记物表达及多向分化潜能)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
α - MEM基础培养基(含10% FBS+1%青霉素/链霉素+成纤维生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~48 - 72小时(依赖接种密度与生长因子浓度)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或人体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀离心
• 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时平衡
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(推荐每4 - 5天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(建议初始接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
• 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
• 避免消化时间过长(防止膜表面受体降解)
• 首次传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO+海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 消化离心后重悬于冻存液,分装至标记冻存管
• 梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
• 复苏后12小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
• 功能验证:成骨/成脂分化潜能检测(P5代细胞需保持多向分化能力)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录证明)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供qPCR或培养法检测结果)
3. 复苏后细胞贴壁率低于80%(需提供明场显微镜图像)
4. 流式检测干性标记物(如CD90/CD105阳性率<95%)
不予重发情形
1. 未按说明书进行预包被培养器皿
2. 自行更改培养基配方导致细胞分化或衰老
3. 未使用推荐传代试剂引发细胞膜损伤
4. 超过规定代数(P10)后出现功能退化