一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠牙周膜成纤维细胞（Mouse Periodontal Ligament Fibroblasts）
- 细胞别称：MPDLF；牙周膜细胞；牙周成纤维细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：6 - 8周龄健康小鼠（性别不限，供体无牙周疾病史）
- 组织来源：牙周膜组织（分离自磨牙根周结缔组织）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或纺锤状，融合后呈平行束状排列
- 细胞代数：P3 - P8（保持成骨分化潜能及胶原分泌功能）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：高糖DMEM（含10% FBS+1%非必需氨基酸+2mM L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖特性：倍增时间约24 - 48小时（受细胞密度及血清浓度影响）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或转基因动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀；培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶），37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：终止消化时立即加入含血清培养基中和酶活性；传代后需补充50μg/mL抗坏血酸以维持胶原合成功能
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：离心后重悬于预冷冻存液，分装至冻存管；梯度降温程序：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存
- 复苏验证：复苏后12小时检测细胞贴壁率（应≥85%）；功能验证：碱性磷酸酶活性检测（P5代细胞应保持成骨分化能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：1.物流温度记录异常导致细胞失活（需提供运输温度曲线）；2.5日内证实微生物污染（需提供染色或PCR检测结果）；3.复苏后细胞存活率低于85%（台盼蓝染色法验证）；4.物种鉴定与产品描述不符
- 不予重发情形：1.未按推荐方法进行胶原酶辅助消化导致细胞损伤；2.使用含β - 甘油磷酸的诱导培养基导致异常矿化；3.未定期进行支原体检测引发的交叉污染；4.液氮储存设备故障导致的反复冻融
