一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠脉络膜成纤维细胞(Mouse Choroidal Fibroblasts)
- 细胞别称:MCF;脉络膜基质细胞;眼纤维母细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体筛选无眼部疾病史)
- 组织来源:脉络膜组织(富含血管的脉络膜层分离)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型长梭形或星形,胞质延展呈网状连接
- 细胞代数:P3 - P8(保证功能活性与分泌特性稳定)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS+1%成纤维细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及胎牛血清替代物),液氮长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(受细胞密度及传代处理影响)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(贴壁细胞铺展均匀时操作)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化30秒 - 1分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 终止消化时加入含血清培养基中和
- 避免频繁观察干扰细胞贴壁(传代后静置24小时)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:专用无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后缓慢混合冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:胶原分泌检测(P5代细胞应维持基质合成能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 1.运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
- 2.到货72小时内证实真菌/支原体污染(需提供检测报告)
- 3.细胞贴壁率低于80%(48小时显微镜观察评估)
- 4.物种鉴定结果不符
- 不予重发情形:
- 1.解冻后未及时接种(超过6小时未处理)
- 2.自行修改培养基成分导致功能异常
- 3.未按规范进行传代(如机械刮取代替消化)
- 4.实验操作污染引发的细胞状态问题