一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠结膜上皮细胞(Mouse Conjunctival Epithelial Cells)
细胞别称:MCjEC;结膜上皮细胞;眼表上皮细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年鼠(性别不限,无眼部疾病史)
组织来源:结膜上皮组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被基质)
细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈扁平多角形
细胞代数:P3 - P6(推荐使用代数以保证功能稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:角膜上皮专用培养基(含1.2mM Ca²⁺+表皮生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含8% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(依赖培养基批次及细胞密度)
供应限制:仅用于基础研究,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入3mL预温培养基轻柔混匀
• 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时平衡温湿度
传代标准:融合度达80% - 85%(建议每2 - 3天观察状态)
传代比例:1:2至1:4(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
• 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
• 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
• 禁止剧烈吹打(避免纤毛结构损伤)
• 首次换液需保留50%原培养基以维持细胞黏附
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO+海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
• 离心后缓慢滴加冻存液重悬
• 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮存储
复苏验证:
• 复苏后12小时进行钙黄绿素染色检测活性(存活率≥90%)
• 功能验证:跨膜电阻值测定(P3代细胞应维持屏障完整性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
2. 48小时内证实真菌污染(需提供革兰氏染色证据)
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微照片)
4. 种属鉴定结果不符
不予重发情形:
1. 未使用专用培养基导致细胞分化异常
2. 擅自修改消化程序引起细胞膜损伤
3. 超过推荐代数(P6以上)继续传代导致功能丧失
4. 未按要求进行定期支原体检测
(注:所有数据基于C57BL/6品系小鼠原代细胞测试结果,不同亚系可能存在特性差异,建议开展预实验验证。)