小鼠结膜上皮细胞

小鼠原代细胞

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XM-X05955×10^5小鼠原代细胞4500


一、细胞基本属性

细胞名称:小鼠结膜上皮细胞(Mouse Conjunctival Epithelial Cells)

细胞别称:MCjEC;结膜上皮细胞;眼表上皮细胞

种属来源:小鼠(Mus musculus)

年龄性别:健康成年鼠(性别不限,无眼部疾病史)

组织来源:结膜上皮组织

生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被基质)

细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈扁平多角形

细胞代数:P3 - P6(推荐使用代数以保证功能稳定性)

细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

培养基:角膜上皮专用培养基(含1.2mM Ca²⁺+表皮生长因子)

培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含8% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存

倍增时间:约36 - 48小时(依赖培养基批次及细胞密度)

供应限制:仅用于基础研究,不可用于临床或药物开发


二、细胞培养操作指南

收货处理:

• 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入3mL预温培养基轻柔混匀

• 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时平衡温湿度

传代标准:融合度达80% - 85%(建议每2 - 3天观察状态)

传代比例:1:2至1:4(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)

消化方法:

• 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)

• 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止

注意事项:

• 禁止剧烈吹打(避免纤毛结构损伤)

• 首次换液需保留50%原培养基以维持细胞黏附


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO+海藻糖保护剂)

细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL

冻存步骤:

• 离心后缓慢滴加冻存液重悬

• 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮存储

复苏验证:

• 复苏后12小时进行钙黄绿素染色检测活性(存活率≥90%)

• 功能验证:跨膜电阻值测定(P3代细胞应维持屏障完整性)


四、售后服务承诺

重发标准:

1. 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)

2. 48小时内证实真菌污染(需提供革兰氏染色证据)

3. 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微照片)

4. 种属鉴定结果不符

不予重发情形:

1. 未使用专用培养基导致细胞分化异常

2. 擅自修改消化程序引起细胞膜损伤

3. 超过推荐代数(P6以上)继续传代导致功能丧失

4. 未按要求进行定期支原体检测


(注:所有数据基于C57BL/6品系小鼠原代细胞测试结果,不同亚系可能存在特性差异,建议开展预实验验证。)