一、细胞基本属性
细胞名称
小鼠角膜基质细胞(Mouse Corneal Stromal Cells)
细胞别称
MCSC;角膜成纤维细胞;角膜间充质细胞
种属来源
小鼠(Mus musculus)
年龄性别
健康成年鼠(性别不限,供体筛选无眼部疾病史)
组织来源
角膜基质层
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
长梭形或多角形,具有星状胞质突起
细胞代数
P3 - P6(维持基质细胞表型稳定性)
细胞规格
5×10⁴ cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管(含专用冻存液)
培养基
DMEM/F12(含10% FBS+碱性成纤维细胞生长因子)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无动物成分冻存液(含7.5% DMSO+海藻糖),-150℃以下长期保存
倍增时间
约60 - 72小时(与细胞传代次数相关)
供应限制
仅限基础研究使用,不可用于药物开发或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴轻柔摇晃解冻,加入3mL预温培养基低速离心洗涤
培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
传代标准
细胞融合度达80% - 85%(基质细胞过度融合易发生表型转化)
传代比例
1:2至1:4(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
使用0.25%胰蛋白酶 - 0.02% EDTA混合消化液
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
消化终止时需加入含血清培养基充分中和
传代后48小时内避免换液以保持基质细胞分泌活性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含7.5% DMSO+10%海藻糖)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
消化收集细胞后800rpm离心5分钟
程序降温:4℃平衡30分钟 → -80℃冷冻盒保存24小时 → 液氮长期储存
复苏验证
复苏后48小时检测细胞贴壁率(标准≥85%)
功能验证:Ⅰ型胶原分泌量检测(P3代细胞应保持基质特性)
四、售后服务承诺
重发标准
1.物流温度记录异常导致细胞失活(需提供运输温度曲线)
2.到货72小时内证实真菌污染(需提供革兰氏染色证据)
3.细胞贴壁率低于80%(需提供相差显微镜图像)
4.物种鉴定与小鼠基因组不符
不予重发情形
1.客户擅自使用传代次数超过P8的细胞进行实验
2.未使用胶原包被培养器皿导致细胞形态异常
3.未按规定进行细胞外基质成分检测
4.实验操作不当引起的细胞分化现象
注:本产品配套提供角膜基质细胞特异性标志物(Lumican、Keratan Sulfate)检测指南。所有操作应遵守II级生物安全规范,建议在超净台内完成细胞处理。