一、细胞基本属性
1. 细胞名称:小鼠嗅球神经干细胞(Mouse Olfactory Bulb Neural Stem Cells)
2. 细胞别称:OB - NSC;嗅球干细胞;嗅球神经前体细胞
3. 种属来源:小鼠(Mus musculus)
4. 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体无神经系统疾病史)
5. 组织来源:嗅球组织神经干细胞富集区域
6. 生长特性:贴壁/悬浮混合生长(依赖基质胶或神经球形成)
7. 细胞形态:增殖期呈球形集落,贴壁分化后展现神经元样或胶质细胞样形态
8. 细胞代数:P3 - P8(维持干细胞特性及分化潜能)
9. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:神经干细胞专用培养基(无血清配方,含EGF、bFGF及B27添加剂)
11. 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
13. 倍增时间:~24 - 48小时(依赖生长因子浓度及培养密度)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或活体移植
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基,接种至基质胶包被培养器皿
- 培养瓶:酒精擦拭外壁,静置培养箱30分钟平衡后更换新鲜培养基
2. 传代标准:神经球直径达100 - 150μm或贴壁细胞融合度达80% - 90%
3. 传代比例:1:2至1:3(机械分离或酶消化后接种)
4. 消化方法:使用Accutase或低浓度胰酶(含EDTA),37℃消化3 - 5分钟,离心去除消化液后轻柔吹散细胞团
5. 注意事项:避免过度机械剪切(防止神经球结构损伤),传代后48小时内避免换液以维持生长因子浓度
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10%DMSO及糖原保护剂)
2. 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤:离心收集细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管,按梯度降温程序保存:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
4. 复苏验证:复苏后48小时检测细胞活性(台盼蓝染色存活率≥90%),分化潜能验证(多巴胺能神经元或胶质细胞定向诱导实验)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程中干冰耗尽或温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 7天内证实微生物污染(需提交第三方检测报告)
- 细胞活性低于85%(台盼蓝染色法)
- 干细胞标志物(如Nestin、Sox2)表达检测未达标
2. 不予重发情形
- 客户未按推荐方法进行神经球传代或贴壁培养
- 使用含血清培养基导致细胞自发分化
- 冻存管未经梯度降温直接投入液氮
- 未进行干细胞特性鉴定即开展后续实验