一、细胞基本属性
1. 细胞名称：小鼠嗅鞘细胞（Mouse Olfactory Ensheathing Cells）
2. 细胞别称：OECs；嗅神经鞘细胞；嗅球胶质细胞
3. 种属来源：小鼠（Mus musculus）
4. 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无神经系统疾病史）
5. 组织来源：嗅球或嗅神经层
6. 生长特性：贴壁生长（依赖多聚赖氨酸或层粘连蛋白包被）
7. 细胞形态：双极或三极纺锤形，胞体细长，可见突起交错
8. 细胞代数：P2 - P6（确保轴突支持活性与分泌功能稳定）
9. 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管（无血清冻存体系）
10. 培养基：胶质细胞专用培养基（含2%胎牛血清+神经营养因子组合）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无动物源冻存液（含10% DMSO及细胞膜稳定剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：约72 - 96小时（受神经生长因子浓度影响显著）
14. 供应限制：仅用于基础研究，不可用于人体治疗或转基因生物构建
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴轻柔摇晃解冻，加入3mL预温培养基低速离心（800rpm，5分钟）后重悬接种
- 培养瓶：酒精消毒外壁后静置培养箱4小时再换液
2. 传代标准：细胞密度达80% - 85%融合（通常培养5 - 7天）
3. 传代比例：1:1至1:2（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察突起回缩后立即终止
5. 注意事项
- 消化后需轻柔吹打避免机械损伤
- 传代后48小时内避免频繁观察以降低应激
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清神经细胞专用冻存液（含海藻糖替代DMSO）
2. 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心后缓慢滴加冻存液预冷至4℃
- 程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃专用冻存盒24小时→液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后48小时进行NF - L免疫荧光鉴定纯度（应≥90%）
- 功能验证：神经营养因子分泌检测（P3代细胞BDNF分泌量≥50pg/10⁴ cells）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输记录显示超温超过30分钟（需提供物流温度曲线）
- 7日内经qPCR确认支原体污染
- 细胞贴壁率低于80%（接种后72小时显微成像证明）
- GFAP/S100β双标鉴定不符合标准
2. 不予重发情形
- 未使用指定包被材料导致细胞无法贴壁
- 擅自添加高浓度血清引起分化异常
- 培养环境CO₂浓度波动超过±2%
- 未执行推荐的神经细胞专用培养流程
