一、细胞基本属性
1. 细胞名称:小鼠三叉神经元细胞(Mouse Trigeminal Neuron Cells)
2. 细胞别称:三叉神经节神经元细胞;TG神经元细胞
3. 种属来源:小鼠(Mus musculus)
4. 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,无神经系统疾病史)
5. 组织来源:三叉神经节组织
6. 生长特性:贴壁生长(需多聚赖氨酸或层粘连蛋白包被培养器皿)
7. 细胞形态:典型神经元形态,胞体呈球形或锥形,可见轴突及树突结构
8. 细胞代数:原代细胞或P1 - P3代(维持电生理活性及神经特异性标记)
9. 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:神经细胞专用培养基(含2% B27添加剂及神经营养因子)
11. 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及神经细胞保护剂),-150℃以下长期保存
13. 倍增时间:原代神经元不增殖,传代后细胞活性维持7 - 10天
14. 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于活体移植或临床用途
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精消毒表面,静置培养箱4小时后再观察贴壁情况
2. 传代标准
- 原代细胞不建议传代;永生化细胞系融合度达80% - 85%时传代
3. 传代比例:1:1至1:2(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA或神经细胞专用解离试剂
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下见轴突断裂后立即终止
5. 注意事项
- 避免机械吹打损伤轴突结构
- 换液时保留50%原培养基以维持神经活性因子
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清神经细胞冻存液(含10% DMSO及抗氧化剂)
2. 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→转入液氮
4. 复苏验证
- 复苏后48小时检测NeuN/Tuj1免疫荧光阳性率(≥90%)
- 功能验证:钙离子成像检测电生理响应活性
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控截图)
- 7天内经PCR证实真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告)
- 免疫荧光标记阳性率低于80%(需提供染色原始图像)
- 基因型鉴定与品系信息不符
2. 不予重发情形
- 原代细胞收货后未在24小时内接种
- 使用非包被培养器皿导致贴壁失败
- 未添加神经营养因子引发细胞凋亡
- 自行修饰细胞基因组后导致功能异常