一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠室管膜细胞(Mouse Ependymal Cells)
- 细胞别称:脑室上皮细胞;室管膜上皮细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无神经系统疾病史)
- 组织来源:脑室系统室管膜层
- 生长特性:贴壁生长(需预包被多聚赖氨酸或层粘连蛋白基质)
- 细胞形态:立方状或柱状单层排列,表面可见纤毛结构
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用前五代以保证纤毛运动功能)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Neurobasal培养基(含2% B27添加剂+20ng/mL EGF)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约72 - 96小时(受纤毛分化状态影响)
- 供应限制:仅限基础研究使用,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞密度达80% - 90%融合(纤毛可见明显同步摆动)
- 传代比例:1:2至1:3(基质包被后接种)
- 消化方法:使用0.02%胰酶 - EDTA溶液轻柔消化,37℃作用30 - 60秒后机械吹打分离
- 注意事项:
- 纤毛保护:消化全程需避免剧烈震荡
- 传代后48小时内禁止换液以维持细胞极性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+5%蔗糖)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:梯度降温程序:4℃平衡30分钟→ - 80℃冷冻盒过夜→液氮长期储存
- 复苏验证:
- 存活率检测:复苏后纤毛活性需维持>70%(高速显微成像验证)
- 功能验证:P3代细胞应保持脑脊液定向流动支持能力
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 1.运输温度记录异常导致细胞失活
- 2.到货48小时内经PCR证实支原体污染
- 3.STR位点与数据库不匹配
- 4.纤毛活性低于声明标准
- 免责条款:
- 1.客户未使用指定基质包被培养器皿
- 2.擅自改用悬浮培养体系
- 3.超过推荐代数(P8)仍进行实验
- 4.未按规范检测纤毛功能直接用于跨膜转运研究
(注:所有数据基于标准培养条件测试,实际应用需根据实验体系优化参数)