一、细胞基本属性
1. 细胞名称:小鼠脊髓星形胶质细胞(Mouse Spinal Cord Astrocytes)
2. 细胞别称:脊髓星形胶质细胞;中枢神经系统星形胶质细胞
3. 种属来源:小鼠(Mus musculus)
4. 年龄性别:健康成年小鼠(周龄6 - 8周,性别不限,供体无神经疾病史)
5. 组织来源:脊髓组织(经解剖分离及特异性标记物筛选)
6. 生长特性:贴壁生长(需多聚赖氨酸包被培养器皿)
7. 细胞形态:典型星状多突起结构,胞体透亮,核质比适中
8. 细胞代数:P3 - P8(经GFAP免疫荧光鉴定纯度≥95%)
9. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:DMEM/F12(含10% FBS + 2mM GlutaMAX + 1% NEAA + 星形胶质细胞生长因子添加剂)
11. 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
13. 倍增时间:~72 - 96小时(与培养基批次及细胞密度相关)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡温湿度
2. 传代标准:细胞融合度达90% - 95%(通常每5 - 7天传代一次)
3. 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察突起回缩后终止反应
5. 注意事项
- 消化后需轻柔吹打避免机械损伤
- 传代后48小时内避免频繁移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
2. 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心后重悬细胞于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后24小时GFAP免疫荧光检测纯度
- 功能验证:谷氨酸摄取实验(P5代细胞应维持≥80%活性)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 7日内经检测确认支原体污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)
- 细胞标志物表达不符合技术参数
2. 不予重发情形
- 未使用指定包被基质导致贴壁失败
- 培养温度或CO₂浓度长期偏离推荐参数
- 未按要求进行传代前GFAP鉴定
- 自行修改冻存液配方引发的细胞损伤