一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠三叉神经星形胶质细胞(Mouse Trigeminal Nerve Astrocytes)
细胞别称:三叉神经胶质细胞、脑神经星形胶质细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成体(性别不限,供体筛选无神经系统疾病史)
组织来源:三叉神经节及周围神经组织
生长特性:贴壁生长(需多聚赖氨酸包被培养器皿)
细胞形态:典型星状多极形态,胞体延伸细长突起
细胞代数:P3 - P6(维持胶质细胞特异性标志物表达)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12培养基(含10%胎牛血清+2mM GlutaMAX+1%非必需氨基酸+10ng/mL EGF)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮气相长期保存
倍增时间:约72 - 96小时(受细胞密度及培养条件影响)
供应限制:仅限科研使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接置于培养箱平衡2小时
传代标准:细胞融合度达90% - 95%(通常每5 - 7天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.05%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍培养瓶促使细胞脱落
注意事项:
- 避免机械刮取损伤细胞膜完整性
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含5% DMSO及糖原保护剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃预冷30分钟→ - 80℃冷冻盒过夜→液氮长期存储
复苏验证:
- 复苏后48小时检测GFAP免疫荧光染色(阳性率≥98%)
- 功能验证:谷氨酸摄取能力检测(P4代细胞应保持正常代谢活性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控报告)
2. 到货7日内经PCR证实支原体污染(需提供完整检测数据)
3. 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法复检)
4. 物种鉴定结果与标识不符
不予重发情形:
1. 解冻后未及时接种(超过说明书规定时限)
2. 自行更换培养基导致细胞形态异常
3. 未按规范进行神经胶质细胞分化诱导
4. 实验操作污染未及时反馈
(本产品经STR鉴定及支原体检测,附原代细胞分离流程记录)