一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠下丘脑神经元细胞(Mouse Hypothalamic Neuronal Cells)
- 细胞别称:下丘脑神经细胞;Hypothalamic Neurons
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无神经系统疾病史)
- 组织来源:下丘脑组织
- 生长特性:贴壁生长(需多聚赖氨酸或层粘连蛋白包被培养皿)
- 细胞形态:典型神经元形态,胞体呈圆形或多极状,可见轴突及树突延伸
- 细胞代数:原代细胞或低传代(P0 - P3,维持神经元特性与功能)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶(预包被基质)或1mL冻存管(含神经专用冻存液)
- 培养基:神经基础培养基(含2% B27添加剂、1%谷氨酰胺及神经营养因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:神经细胞专用冻存液(含10% DMSO及胎牛血清), -150℃以下长期保存
- 倍增时间:原代神经元为非分裂终末细胞,无增殖能力
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预温的神经培养基轻柔混匀,离心去除冻存液后接种
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置于培养箱内2小时以平衡温湿度
- 传代标准:原代神经元不建议常规传代;如需处理,建议直接使用或短期维持培养
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含DNase I),37℃消化3 - 5分钟,镜下观察胞体收缩后终止
- 轻柔吹打避免机械损伤,离心后更换预包被培养皿接种
- 注意事项:
- 严格避免污染,操作全程在生物安全柜内进行
- 培养基需每48小时更换,清除死亡细胞碎片
- 培养环境需避光、低振动,维持神经元活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:神经专用冻存液(含10% DMSO、20%胎牛血清及葡萄糖保护剂)
- 细胞密度:建议冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ -80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥80%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:免疫荧光检测神经元标志物(如NeuN、MAP2)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中温度记录异常导致细胞死亡(需提供物流温度监控证明)
- 收到后72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
- 细胞存活率低于80%(经台盼蓝染色确认)
- 细胞标志物鉴定与描述不符
- 不予重发情形:
- 未使用推荐预包处理培养皿或培养基
- 操作不当导致机械损伤(如过度吹打)
- 冻存细胞未经程序降温直接投入液氮
- 未在48小时内首次更换培养基
- 注:本产品需由具备神经元培养经验的操作者使用,建议在收到后立即进行相关功能验证