一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠星形胶质细胞(Mouse Astrocytes)
- 细胞别称:星形胶质细胞;CNS星形胶质细胞;脑胶质细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:新生1-3天乳鼠(性别不限,供体筛选无神经系统疾病史)
- 组织来源:脑组织(大脑皮层或海马区)
- 生长特性:贴壁生长(需多聚赖氨酸或层粘连蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型多极星形,胞体饱满且延伸丰富胞突
- 细胞代数:P2 - P5(确保功能活性与纯度)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS+2mM谷氨酰胺+1%非必需氨基酸+星形胶质细胞专用添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖培养密度及生长因子补充)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡1小时后换液
- 传代标准:细胞融合度达80 - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱落
- 注意事项:
- 避免机械损伤胞突(影响细胞网络连接)
- 传代后48小时内避免频繁观察,减少扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时GFAP免疫荧光鉴定纯度(≥95%)
- 功能验证:谷氨酸摄取实验(P3代细胞活性需达标准)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供温度记录证据)
- 7天内证实支原体或真菌污染(需提供qPCR检测报告)
- 细胞贴壁率低于80%(复苏后72小时评估)
- GFAP阳性率与宣传不符(需提供流式检测结果)
- 不予重发情形:
- 未使用推荐包被材料导致细胞贴壁失败
- 培养过程中添加未经验证的生长因子
- 细胞冻存前未进行活性检测
- 超过推荐代数(P5)后使用导致功能异常