一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠脊髓神经元细胞(Mouse Spinal Cord Neuronal Cells)
- 细胞别称:脊髓神经细胞;脊髓神经元原代细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 发育阶段:新生鼠(C57BL/6品系,无神经退行性疾病遗传背景)
- 组织来源:脊髓背根神经节及中央灰质区
- 生长特性:贴壁生长(需多聚赖氨酸或层粘连蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型多极神经元形态,胞体呈球形,具轴突与树突分支
- 细胞代数:原代细胞(P0 - P3,建议低代次使用以保持电生理活性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25包被培养瓶或1mL神经元专用冻存管
- 培养基:Neurobasal培养基(含2% B27添加剂、0.5mM谷氨酰胺及神经营养因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:神经元专用无血清冻存液(含5% DMSO+蔗糖保护剂),液氮长期保存
- 功能特性:表达β - III Tubulin及NeuN标志物,具备钠钾离子通道活性
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于活体移植或药物筛选
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预热的神经元培养基轻柔混匀
- 包被培养瓶:直接置于CO₂培养箱,4小时内勿移动
- 传代建议:原代神经元不建议常规传代,必要时采用机械吹打法收集细胞
- 接种密度:建议初始密度≥1×10⁴ cells/cm²(低密度导致突触形成障碍)
- 培养基更换:每48小时半量换液,避免神经营养因子浓度波动
- 注意事项
- 严格避免反复震荡或高速离心(损伤轴突结构)
- 培养全程使用神经元专用包被耗材
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清神经元冻存液(含5% DMSO+12%蔗糖)
- 冻存密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL(高密度提升复苏后存活率)
- 冻存程序:4℃预冷15分钟 → -80℃程序降温盒过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 存活率≥90%(钙黄绿素 - AM/PI双染色法)
- 功能验证:48小时内检测自发钙离子振荡信号
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 干冰运输链断裂导致细胞团块溶解(需提供物流温度记录)
- 到货72小时内经PCR证实支原体污染
- β - III Tubulin免疫荧光染色阳性率<95%
- 未按规定使用包被耗材导致细胞贴壁失败(需提供培养记录)
- 不予重发情形
- 解冻后未立即接种或延迟培养超过6小时
- 擅自使用非神经元专用培养基(如DMEM/F12)
- 未按规范进行包被预处理直接培养
- 实验操作不当引发氧化应激损伤(如暴露于强光照环境)