一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠脑皮层神经元细胞(Mouse Cerebral Cortex Neuronal Cells)
细胞别称:皮层神经元细胞;脑神经元原代细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
发育阶段:胎鼠或新生鼠(妊娠期14 - 18天或出生24小时内取材)
组织来源:脑皮层组织(机械分离结合酶消化法)
生长特性:贴壁生长(需Poly - D - Lysine/Laminin包被培养器皿)
细胞形态:典型多极神经元形态,胞体呈锥形或球形,具有轴突与树突分支
细胞代数:原代细胞(P0)或低传代培养(P1 - P3建议使用)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25包被培养瓶或1mL冻存管(神经专用冻存液)
培养基:神经基础培养基(含2% B27添加剂+1% GlutaMAX+25μM谷氨酸)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:神经细胞专用冻存液(含DMSO及抗氧化剂),液氮气相长期保存
功能特征:表达β - III Tubulin及MAP2标记,具有自发放电与钙震荡特性
供应限制:仅限体外研究使用,不可用于体内移植或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后接种于预包被培养器皿
• 培养瓶:维持原培养基静置48小时后再首次换液
换液频率:每2 - 3天半量换液(避免机械剪切损伤神经元突触网络)
传代建议:原代神经元不建议常规传代,特殊需求需采用Accutase温和消化
培养监测:
• 每日观察细胞突触延伸情况
• 培养第3天添加5 - 氟 - 2'-脱氧尿苷(10μM)抑制胶质细胞增殖
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:神经细胞专用无血清冻存液(含7.5% DMSO+10%蔗糖)
冻存密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL(高密度维持细胞存活率)
冻存程序:
• 4℃预冷冻存管平衡30分钟
• 程序降温仪以 - 1℃/min速率降温至 - 80℃
• 24小时内转移至液氮气相长期保存
复苏验证:
• 复苏后48小时β - III Tubulin免疫荧光染色确认纯度≥90%
• 钙离子成像检测功能性神经元占比
四、售后服务承诺
质量保障:
1. 液氮运输全程温度监控(附温度记录芯片数据)
2. 发货前完成支原体检测(PCR法)及神经特异性标记鉴定
重发条款:
• 到货72小时内反馈并提供证据可申请重发:
1) 干冰耗尽导致细胞活性<80%(台盼蓝检测)
2) 神经元纯度<85%(免疫荧光定量报告)
3) 自发钙震荡功能缺失(视频证据)
免责声明:
• 未使用预包被培养器皿导致的贴壁失败
• 培养72小时后未添加抗有丝分裂剂导致的胶质细胞污染
• 自行传代操作引起的神经元网络破坏