一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠脾淋巴细胞(Mouse Splenic Lymphocytes)
- 细胞别称:脾脏淋巴细胞;脾脏免疫细胞;SPL
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(周龄6 - 8周,性别不限,SPF级饲养)
- 组织来源:脾脏组织机械分离或酶解制备
- 生长特性:悬浮生长(原代细胞需添加细胞因子维持活性)
- 细胞形态:小圆形细胞,直径6 - 8微米,单核为主,部分细胞呈活化态聚集
- 细胞代数:原代细胞(不可传代扩增,仅限单次实验使用)
- 细胞规格:5×10^6 cells/冻存管(含无血清冻存液)或新鲜分离悬液(5×10^7 cells/mL)
- 培养基:RPMI 1640(含10% FBS+1%双抗+50 μM β - 巯基乙醇)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下保存
- 活性维持:分离后建议24小时内使用,冻存细胞复苏后活性≥90%
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于活体回输或基因改造
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 新鲜悬液:4℃静置30分钟后轻柔混匀,避免剧烈震荡
- 培养建议
- 原代细胞建议直接用于实验,若短期培养需添加20 U/mL IL - 2
- 培养密度维持1×10^6 cells/mL,每24小时半量换液
- 注意事项
- 避免长时间离心(建议300×g,10分钟)
- 培养超过48小时需补充新鲜细胞因子
- 接触脂多糖(LPS)或ConA可诱导活化
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
- 冻存密度:1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 台盼蓝染色检测存活率≥85%
- 功能验证:CFSE增殖实验或流式检测表面标记(CD3+/CD19+)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 到货48小时内证实细菌污染(需提供革兰氏染色证据)
- 新鲜细胞悬液活率低于80%(流式PI染色法)
- 细胞亚群比例与说明书偏差>20%(流式CD3/CD19分析)
- 不予重发情形
- 分离后超72小时启动实验导致功能异常
- 未按规范添加细胞因子导致凋亡
- 采用胰酶消化等破坏性操作
- 未使用推荐冻存液导致复苏失败
(注:本产品为原代细胞,建议到货后优先开展实验,长期冻存可能影响功能特性。)