小鼠脾淋巴细胞

小鼠原代细胞

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XM-X05605×10^5小鼠原代细胞4320


一、细胞基本属性

- 细胞名称:小鼠脾淋巴细胞(Mouse Splenic Lymphocytes)

- 细胞别称:脾脏淋巴细胞;脾脏免疫细胞;SPL

- 种属来源:小鼠(Mus musculus)

- 年龄性别:健康成年小鼠(周龄6 - 8周,性别不限,SPF级饲养)

- 组织来源:脾脏组织机械分离或酶解制备

- 生长特性:悬浮生长(原代细胞需添加细胞因子维持活性)

- 细胞形态:小圆形细胞,直径6 - 8微米,单核为主,部分细胞呈活化态聚集

- 细胞代数:原代细胞(不可传代扩增,仅限单次实验使用)

- 细胞规格:5×10^6 cells/冻存管(含无血清冻存液)或新鲜分离悬液(5×10^7 cells/mL)

- 培养基:RPMI 1640(含10% FBS+1%双抗+50 μM β - 巯基乙醇)

- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下保存

- 活性维持:分离后建议24小时内使用,冻存细胞复苏后活性≥90%

- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于活体回输或基因改造


二、细胞培养操作指南

- 收货处理

    - 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基

    - 新鲜悬液:4℃静置30分钟后轻柔混匀,避免剧烈震荡

- 培养建议

    - 原代细胞建议直接用于实验,若短期培养需添加20 U/mL IL - 2

    - 培养密度维持1×10^6 cells/mL,每24小时半量换液

- 注意事项

    - 避免长时间离心(建议300×g,10分钟)

    - 培养超过48小时需补充新鲜细胞因子

    - 接触脂多糖(LPS)或ConA可诱导活化


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)

- 冻存密度:1×10^7 cells/mL

- 冻存步骤

    - 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液

    - 梯度降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存

- 复苏验证

    - 台盼蓝染色检测存活率≥85%

    - 功能验证:CFSE增殖实验或流式检测表面标记(CD3+/CD19+)


四、售后服务承诺

- 重发标准

    - 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)

    - 到货48小时内证实细菌污染(需提供革兰氏染色证据)

    - 新鲜细胞悬液活率低于80%(流式PI染色法)

    - 细胞亚群比例与说明书偏差>20%(流式CD3/CD19分析)

- 不予重发情形

    - 分离后超72小时启动实验导致功能异常

    - 未按规范添加细胞因子导致凋亡

    - 采用胰酶消化等破坏性操作

    - 未使用推荐冻存液导致复苏失败


(注:本产品为原代细胞,建议到货后优先开展实验,长期冻存可能影响功能特性。)