一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠骨髓肥大细胞(Mouse Bone Marrow Mast Cells)
细胞别称:BMMC;骨髓源肥大细胞;肥大祖细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无免疫缺陷背景)
组织来源:骨髓单核细胞经细胞因子诱导分化
生长特性:悬浮聚集生长(依赖细胞因子组合)
细胞形态:圆形或卵圆形,胞质内含特征性异染颗粒
细胞代数:原代培养或P0 - P3(维持颗粒储存功能)
细胞规格:5×10⁵ cells/冻存管(含无血清冻存液)或培养瓶悬浮液
培养基:RPMI - 1640基础培养基(含10% FBS+20ng/mL IL - 3+50ng/mL SCF)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂),液氮长期保存
增殖能力:培养周期7 - 10天可扩增5 - 8倍(依赖细胞因子活性)
供应限制:仅限体外研究使用,不可用于活体移植或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预温培养基
• 悬浮液:直接转移至15mL离心管,300g离心5分钟收集细胞
传代标准:细胞密度达1×10⁶ cells/mL或培养基颜色显著变黄(通常每周补液2次)
补液方法:
• 半量换液:吸除50%旧培养基,补充等量新鲜预温培养基
• 全量换液需离心收集细胞后重悬扩培
注意事项:
• 维持IL - 3浓度不低于10ng/mL防止自发凋亡
• 避免剧烈吹打导致颗粒提前释放
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+1% HSA)
冻存密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存程序:
• 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀
• 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃冷冻盒过夜→液氮储存
复苏检测:
• 存活率≥85%(吖啶橙/碘化丙啶双染法)
• 功能验证:钙离子载体刺激后β - 己糖胺酶释放率>40%
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 液氮运输罐真空失效导致细胞复苏失败(需提供温度记录曲线)
2. 到货48小时内证实真菌污染(需提供镜检图像)
3. 流式检测c - Kit阳性率<90%(P0代细胞)
4. 未检测到FcεRI表面表达
免责条款:
1. 客户未按推荐浓度添加细胞因子导致分化异常
2. 使用胎牛血清替代HSA进行冻存操作
3. 实验过程中发生脱颗粒未及时终止培养
4. 超过72小时未处理到货细胞导致悬浮聚集解体
(注:本产品需配合特异性激活试剂盒使用,脱颗粒实验建议在P1代内完成)