小鼠骨髓肥大细胞

小鼠原代细胞

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XM-X05585×10^5小鼠原代细胞5750


一、细胞基本属性

细胞名称:小鼠骨髓肥大细胞(Mouse Bone Marrow Mast Cells)

细胞别称:BMMC;骨髓源肥大细胞;肥大祖细胞

种属来源:小鼠(Mus musculus)

年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无免疫缺陷背景)

组织来源:骨髓单核细胞经细胞因子诱导分化

生长特性:悬浮聚集生长(依赖细胞因子组合)

细胞形态:圆形或卵圆形,胞质内含特征性异染颗粒

细胞代数:原代培养或P0 - P3(维持颗粒储存功能)

细胞规格:5×10⁵ cells/冻存管(含无血清冻存液)或培养瓶悬浮液

培养基:RPMI - 1640基础培养基(含10% FBS+20ng/mL IL - 3+50ng/mL SCF)

培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂),液氮长期保存

增殖能力:培养周期7 - 10天可扩增5 - 8倍(依赖细胞因子活性)

供应限制:仅限体外研究使用,不可用于活体移植或药物开发


二、细胞培养操作指南

收货处理:

• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预温培养基

• 悬浮液:直接转移至15mL离心管,300g离心5分钟收集细胞

传代标准:细胞密度达1×10⁶ cells/mL或培养基颜色显著变黄(通常每周补液2次)

补液方法:

• 半量换液:吸除50%旧培养基,补充等量新鲜预温培养基

• 全量换液需离心收集细胞后重悬扩培

注意事项:

• 维持IL - 3浓度不低于10ng/mL防止自发凋亡

• 避免剧烈吹打导致颗粒提前释放


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+1% HSA)

冻存密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL

冻存程序:

• 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀

• 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃冷冻盒过夜→液氮储存

复苏检测:

• 存活率≥85%(吖啶橙/碘化丙啶双染法)

• 功能验证:钙离子载体刺激后β - 己糖胺酶释放率>40%


四、售后服务承诺

重发标准:

1. 液氮运输罐真空失效导致细胞复苏失败(需提供温度记录曲线)

2. 到货48小时内证实真菌污染(需提供镜检图像)

3. 流式检测c - Kit阳性率<90%(P0代细胞)

4. 未检测到FcεRI表面表达

免责条款:

1. 客户未按推荐浓度添加细胞因子导致分化异常

2. 使用胎牛血清替代HSA进行冻存操作

3. 实验过程中发生脱颗粒未及时终止培养

4. 超过72小时未处理到货细胞导致悬浮聚集解体

(注:本产品需配合特异性激活试剂盒使用,脱颗粒实验建议在P1代内完成)