一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠淋巴管成纤维细胞(Mouse Lymphatic Fibroblasts)
- 细胞别称:淋巴管内皮下成纤维细胞;LYVE - 1阳性成纤维细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,无特定病原体感染)
- 组织来源:淋巴管组织(经免疫磁珠分选纯化)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或星状,单层贴壁后呈网状排列
- 细胞代数:P3 - P10(经功能验证确保增殖活性稳定)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Fibroblast Growth Medium(含10% FBS +成纤维细胞特异性添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~36 - 48小时(与培养基批次及细胞密度相关)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀离心
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱内1小时适应
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免机械吹打过猛(防止细胞骨架损伤)
- 传代后12小时内避免移动培养瓶以保证贴壁稳定性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心去除上清,预冷冻存液轻柔重悬细胞
- 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃冷冻盒过渡→液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测细胞存活率(台盼蓝染色法≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认肌成纤维细胞特性
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微图像)
- 标志物检测与说明书不符(LYVE - 1/Prox1阳性率≥95%)
- 不予重发情形:
- 未使用指定胶原包被培养器皿导致贴壁失败
- 自行修改培养基配方引发细胞功能异常
- 未按规范进行传代操作(如过度消化或接种密度过低)
- 实验操作污染未及时反馈(超过到货7天)
(注:所有操作需遵守生物安全规范,细胞特性可能因实验条件存在批次差异,建议收货后3个月内完成关键实验。)