一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠淋巴管内内皮细胞
细胞别称:mLEC;淋巴管内皮细胞;脉管内皮细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体无特定病原体感染史)
组织来源:淋巴管组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈梭形或多边形
细胞代数:P3 - P6(优化代次确保功能稳定性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:Lymphatic Endothelial Cell Medium(含5% FBS+内皮细胞特异性添加因子)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无动物源冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约60 - 72小时(与细胞密度及生长因子浓度相关)
供应限制:仅限于基础研究使用,禁止临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后转移至含5mL培养基的离心管,1000rpm离心3分钟
- 培养瓶:酒精消毒外表面后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每4 - 5天传代)
传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(预温至37℃)
- 消化时间控制在2 - 3分钟,显微镜下观察到细胞间隙增大后立即终止
注意事项:
- 消化过程需轻柔吹打避免机械损伤
- 首次换液需在接种后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:1×10⁶ cells/mL(离心后重悬体积不超过1mL)
冻存步骤:
- 程序降温盒梯度冷冻:4℃平衡30分钟→-80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:VEGFR - 3免疫荧光染色确认标志物表达
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录异常(需提供运输温度曲线)
2. 到货72小时内经检测证实微生物污染
3. 细胞活性低于承诺标准(附第三方检测报告)
4. 物种鉴定结果与协议不符
不予重发情形:
1. 未使用原代细胞专用培养基进行培养
2. 擅自更改消化酶浓度导致细胞损伤
3. 超过建议代次(P6)后出现的功能异常
4. 未按要求进行细胞基质包被