一、细胞基本属性
1. 细胞名称：小鼠脾源性内皮祖细胞（Mouse Spleen - derived Endothelial Progenitor Cells）
2. 细胞别称：SP - EPCs；脾内皮祖细胞；脾源性EPCs
3. 种属来源：小鼠（Mus musculus）
4. 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体经SPF级环境筛选无病原体感染）
5. 组织来源：脾脏组织微血管富集区
6. 生长特性：贴壁生长（需预包被纤连蛋白或明胶基质）
7. 细胞形态：初始呈梭形或纺锤状，增殖期逐渐形成单层多角形结构
8. 细胞代数：P3 - P8（保持内皮祖细胞表型及分化潜能）
9. 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：内皮祖细胞专用培养基（含5% FBS、VEGF、bFGF及肝素）
11. 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：约48 - 72小时（受生长因子浓度及基质影响）
14. 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床或活体移植
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预温培养基轻柔混匀离心
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱2小时稳定微环境
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3天观察一次）
3. 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
5. 注意事项
- 避免剧烈吹打（防止祖细胞活性丢失）
- 首次传代后48小时内避免换液以维持细胞贴壁
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心后重悬细胞于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃平衡30分钟→-80℃过夜→液氮长期储存
4. 复苏验证
- 复苏后12小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：CD34/VEGFR2双标流式检测（P5代细胞阳性率≥80%）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内检出微生物污染（需提供检测报告）
- 复苏存活率低于85%（按规范方法复测）
- 细胞标志物表达与质检报告不符
2. 不予重发情形
- 未按说明进行基质预包被导致贴壁失败
- 自行修改培养基配方引发细胞分化异常
- 解冻后未及时接种或多次离心损伤细胞
- 未按要求执行功能验证即进行后续实验
（注：所有操作需符合生物安全规范，实验前需通过伦理审查备案）
