一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠脾基质细胞(Mouse Spleen Stromal Cells)
细胞别称:脾基质细胞;脾间质细胞;脾支持细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,SPF级实验动物)
组织来源:脾脏基质组织(经机械分离与酶消化纯化)
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:不规则梭形或星形,细胞间形成网状结构
细胞代数:P3 - P6(维持基质细胞分泌功能稳定性)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12(含10% FBS + 2mM L - 谷氨酰胺+ 1%非必需氨基酸)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:约60 - 72小时(与细胞密度及培养条件相关)
供应限制:仅限基础研究,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴解冻后,加入3mL预温培养基低速离心(200g,5分钟)
培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁后换液
传代标准:融合度达80% - 85%(基质细胞需保留部分接触抑制特性)
传代比例:1:2(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.1%胶原酶)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁辅助细胞脱落
注意事项:
基质细胞对机械力敏感,吹打需轻柔
首次传代后48小时内避免换液以保留分泌因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 20% FBS)
细胞密度:冻存浓度5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
离心后缓慢逐滴加入冻存液
程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
复苏后48小时检测细胞活性(存活率≥85%)
功能验证:ELISA检测细胞因子分泌水平(P4代细胞应保持基础分泌功能)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供温度监控记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需第三方检测报告)
3. 台盼蓝检测存活率低于80%
4. 流式细胞术鉴定CD45阴性率未达95%
不予重发情形:
1. 未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
2. 擅自添加高于15%血清改变培养体系
3. 未按推荐传代密度导致细胞过早衰老
4. 未定期检测支原体造成实验室交叉污染
(注:本产品配套提供胶原包埋操作指南及细胞因子分泌谱检测建议)