一、细胞基本属性
1. 细胞名称:小鼠自然杀伤细胞(Mouse Natural Killer Cells)
2. 细胞别称:NK细胞;小鼠脾脏NK细胞
3. 种属来源:小鼠(Mus musculus)
4. 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,无特定病原体感染史)
5. 组织来源:脾脏或骨髓分离纯化
6. 生长特性:悬浮生长(依赖细胞因子维持活性)
7. 细胞形态:圆形或淋巴母细胞样,表面光滑
8. 细胞代数:原代培养或P1 - P3代(保证天然杀伤活性)
9. 细胞规格:1×10^6 cells/冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:RPMI - 1640基础培养基(含10% FBS+IL - 2细胞因子)
11. 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
13. 增殖能力:体外培养维持活性5 - 7天(依赖IL - 2浓度)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
2. 活性维持:每48小时补充IL - 2(终浓度100 - 200 U/mL),避免细胞密度高于1×10^6 cells/mL。
3. 传代方法:离心收集细胞,轻柔吹打重悬于新鲜培养基,按1:2比例传代。
4. 功能检测:细胞毒性实验(推荐铬51释放法或流式细胞术检测CD107a表达)。
5. 注意事项:避免频繁离心或剧烈震荡,防止细胞聚集;培养24小时后检测活性,及时去除死细胞。
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
2. 冻存密度:1×10^7 cells/mL(每管1mL)
3. 冻存步骤:离心收集细胞,重悬于冻存液;程序降温盒转移至 - 80℃过夜,次日转入液氮。
4. 复苏验证:复苏后2小时内检测存活率(台盼蓝染色≥85%),流式检测CD49b(DX5)标志物阳性率≥90%。
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞存活率<80%(需提供温度记录证明)。
- 72小时内证实支原体污染(需提供检测报告)。
- 表面标志物鉴定与描述不符(流式检测CD49b/NK1.1阳性率<80%)。
2. 不予重发情形
- 未按推荐添加IL - 2导致细胞活性丧失。
- 解冻后静置超过6小时未处理。
- 使用非无菌操作导致污染。
- 未进行预实验验证直接开展长期培养。
(注:本产品需配合细胞因子及专用培养基使用,详细操作请参考随附技术手册。)