一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠树突状细胞(Mouse Dendritic Cells)
- 细胞别称:DC细胞;髓样树突状细胞;抗原呈递细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,无特定病原体感染史)
- 组织来源:骨髓或脾脏来源(经细胞因子诱导分化)
- 生长特性:悬浮或半贴壁生长(依赖细胞因子刺激)
- 细胞形态:不规则形态,表面具有典型树突状突起
- 细胞代数:P2 - P5(确保抗原呈递功能稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS+GM - CSF及IL - 4细胞因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 增殖能力:体外刺激后48 - 72小时可形成集落(依赖细胞因子浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:直接置于培养箱平衡30分钟,避免剧烈震荡
- 传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL或集落形成显著(通常每3天传代)
- 传代方法:轻柔吹打收集悬浮细胞,离心后按1:2比例接种
- 注意事项:避免频繁离心损伤细胞膜;维持GM - CSF浓度(20ng/mL)以支持细胞存活;培养全程需无菌操作,定期检测支原体污染
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+30% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:离心后重悬于冻存液,分装至冻存管;程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:台盼蓝染色存活率≥85%;功能验证:CD11c阳性率≥90%(流式细胞术检测)
四、售后服务承诺
- 重发标准:1.运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供温度记录证明);2.到货72小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染图片);3.流式检测CD11c阳性率低于85%;4.细胞数量与标注差异超过20%
- 不予重发情形:1.未按推荐条件添加细胞因子导致分化异常;2.实验操作污染导致细胞状态问题;3.冻存管开封后未一次用完且自行分装;4.超过建议代数(P5)后发生的功能衰减