一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠B淋巴细胞(Mouse B Lymphocytes)
细胞别称:B细胞;B淋巴母细胞;脾脏B淋巴细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别及品系可定制,需提前确认)
组织来源:脾脏或骨髓(无菌分离纯化)
生长特性:悬浮或半贴壁生长(依赖细胞因子支持)
细胞形态:圆形或类圆形,表面光滑呈均质单细胞态
细胞代数:原代培养或永生化细胞系(具体代数根据需求说明)
细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:RPMI 1640+10% FBS+β-巯基乙醇+IL - 4(可选CD40L激活方案)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含5% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
增殖能力:激活后48 - 72小时进入对数生长期(依赖刺激因子浓度)
供应限制:仅限基础研究,不可用于活体移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,预温培养基重悬
- 培养瓶:直接置于CO₂培养箱,静置4小时后轻柔混匀
传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL(激活后需监测细胞团簇形成)
传代方法:
- 无需消化,直接离心收集后按比例稀释
- 激活态细胞需补充新鲜刺激因子(如LPS或抗IgM抗体)
注意事项:
- 避免频繁离心(建议300×g离心3分钟)
- 激活后细胞代谢加快,需每日观察培养基颜色变化
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含5% DMSO及葡萄糖保护剂)
冻存密度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL(高密度可提升复苏效率)
冻存程序:
- 梯度降温:室温→4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
- 存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CD19流式检测纯度≥90%,LPS刺激后IgM分泌量达标
四、售后服务承诺
重发条件:
1. 干冰运输期间温度异常(需提供物流温度记录)
2. 到货48小时内检测出支原体污染(需提供第三方报告)
3. 流式检测CD19阳性率低于85%(非激活状态)
免责条款:
1. 客户未按推荐条件进行细胞激活操作
2. 使用非指定培养基导致细胞凋亡率升高
3. 未在72小时内完成复苏或冻存管开封后二次冻存
4. 未执行流式细胞术定期监控细胞表型
注:本产品需配合B细胞专用激活试剂盒使用,长期培养建议定期补充CD40配体或BAFF因子以维持活性。实验前需根据研究目的选择静息态或激活态细胞培养方案