一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠股骨头微血管内皮细胞（Mouse Femoral Head Microvascular Endothelial Cells）
- 细胞别称：MFMEC；股骨头微血管内皮细胞；骨微血管内皮细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无骨骼疾病史）
- 组织来源：股骨头微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被的培养器皿）
- 细胞形态：单层铺展呈梭形或多角形，接触抑制后形成紧密连接
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性与遗传背景一致性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：小鼠内皮细胞专用培养基（含5% FBS+内皮生长因子及肝素添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖接种密度及培养条件）
- 供应限制：仅限科学研究使用，不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入预热的完全培养基轻柔混匀后离心去冻存液。
- 培养瓶：75%酒精擦拭外表面，置于37℃培养箱平衡2小时后再更换新鲜培养基。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度为3×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液，37℃消化30秒至1分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项：
- 消化时避免剧烈吹打（保护细胞表面黏附分子）。
- 传代后12小时内更换培养基以去除细胞碎片及残留酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）。
- 细胞密度：推荐冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液，分装至冻存管。
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时内通过台盼蓝染色检测细胞存活率（≥90%为合格）。
- 功能验证：CD31免疫荧光染色及血管形成实验（P5代细胞需保持成管能力）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽或温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）。
- 收到后72小时内证实微生物污染（需提供污染检测结果）。
- 复苏后细胞存活率低于90%（需提供台盼蓝染色图片）。
- 细胞种属鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形：
- 客户未按规范储存或延迟复苏超过48小时。
- 使用非指定培养基或擅自修改培养条件导致细胞异常。
- 实验操作失误（如反复冻融或机械损伤）。
- 未提供完整的细胞状态异常证据或检测报告。
