一、细胞基本属性
1. 细胞名称:小鼠骨髓基质干细胞(Mouse Bone Marrow Stromal Cells)
2. 细胞别称:BMSC;骨髓间充质干细胞;骨髓基质细胞
3. 种属来源:小鼠(Mus musculus)
4. 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无代谢性疾病史)
5. 组织来源:骨髓腔(股骨及胫骨骨髓)
6. 生长特性:贴壁生长(依赖胶原或明胶包被培养器皿)
7. 细胞形态:长梭形或成纤维细胞样,贴壁伸展后呈纺锤状
8. 细胞代数:P3 - P8(保证多向分化潜能及遗传稳定性)
9. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:α - MEM基础培养基(含10% FBS+1%双抗+2mM L - 谷氨酰胺)
11. 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
13. 倍增时间:~24 - 48小时(依赖接种密度及血清批次)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱4小时平衡
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
3. 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
5. 注意事项
- 避免消化过度(影响细胞膜表面标志物表达)
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
2. 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心后弃上清,缓慢滴加预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期储存
4. 复苏验证
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥85%)
- 功能验证:成骨/成脂诱导分化实验(P5代细胞应保持多向分化能力)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 1.干冰运输期间温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 2.到货72小时内证实微生物污染(需提供无菌检测报告)
- 3.细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色视频)
- 4.流式检测CD29/CD44阳性率低于90%
2. 不予重发情形
- 1.未使用推荐包被培养器皿导致贴壁失败
- 2.擅自更改培养基配方引发细胞分化异常
- 3.解冻后未立即离心去除冻存液
- 4.未按时传代导致细胞衰老或自发分化
(注:所有操作需符合实验室生物安全规范,建议定期进行支原体检测及核型分析。)