一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠椎体终骨软骨干细胞（Mouse Vertebral Endplate Cartilage Stem Cells）
- 细胞别称：VEP -SCs；椎体终板干细胞；软骨祖细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体经骨科疾病筛查）
- 组织来源：椎体终板软骨组织微环境
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：纺锤形或多角形，高核质比，单层生长时呈漩涡状排列
- 细胞代数：P3 - P8（维持干性标记物表达及分化潜能）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：软骨干细胞专用培养基（含2% FBS、bFGF、TGF -β1及抗坏血酸）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~72 - 96小时（受细胞密度及生长因子浓度影响）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预温培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每4 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.02%胶原酶II+0.05% Trypsin - EDTA混合消化液。
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应。
- 注意事项：
- 避免机械吹打过度（防止干性标记物丢失）。
- 首次换液需在贴壁后12小时内完成。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬细胞于冻存液，分装至冻存管。
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 1小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后48小时内检测存活率（台盼蓝染色≥90%）。
- 功能验证：成软骨诱导分化实验（P5代细胞应形成Alcian蓝阳性基质）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）。
- 7天内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）。
- 细胞活性低于85%（台盼蓝染色结果）。
- 干性标记物（如Sox9、Col2a1）表达不符合标准。
- 不予重发情形：
- 客户未按推荐条件进行细胞复苏或传代。
- 使用非指定培养基导致分化或功能异常。
- 冻存管未经梯度降温直接投入液氮。
- 未定期检测支原体导致实验数据偏差。
