一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠中耳上皮细胞（Mouse Middle Ear Epithelial Cells）
- 细胞别称：MEEpiC；中耳上皮细胞；鼓室上皮细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，经病原体筛查及健康评估）
- 组织来源：中耳黏膜组织（鼓室及听小骨区域）
- 生长特性：贴壁生长（需包被基底膜基质支持）
- 细胞形态：单层铺路石样或多角形，紧密连接成片状
- 细胞代数：P3 - P6（确保上皮屏障功能及分化特性）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：专用上皮细胞培养基（含2% FBS+上皮生长因子及钙离子调节剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含8% DMSO及糖原保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约60 - 72小时（依赖细胞密度及培养环境）
- 供应限制：仅限科学研究，禁止临床或体内应用
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入3mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精消毒后静置培养箱1小时适应环境
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每4 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含钙离子螯合剂）
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免反复吹打损伤微绒毛结构
- 传代后6小时内更换新鲜培养基以稳定细胞极性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO+海藻糖复合保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率（标准≥85%）
- 功能验证：跨膜电阻测定（P4代细胞应保持紧密连接特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内检测出支原体污染（需提供第三方检测报告）
- 复苏后存活率低于85%（台盼蓝染色或荧光活死检测）
- 种属鉴定结果与标注不符
- 不予重发情形：
- 未按说明书要求进行预包被处理
- 使用非指定培养基导致细胞分化异常
- 解冻后未及时接种（超过2小时未处理）
- 自行改造细胞后引发的功能缺陷
