一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠骨膜干细胞(Mouse Periosteal Stem Cells)
- 细胞别称:骨膜来源干细胞;骨膜祖细胞;骨膜间充质干细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:6 - 8周龄健康小鼠(性别可指定雄性或雌性)
- 组织来源:长骨骨膜组织(股骨/胫骨骨膜层)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或多角形,融合后呈致密单层排列
- 细胞代数:P3 - P8(维持干细胞多向分化潜能)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:α - MEM基础培养基(含10% FBS+1%双抗+成骨诱导添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),- 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(依赖细胞密度及培养基成分)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床治疗或人体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭外壁,静置培养箱4小时待细胞贴壁
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐初始密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱离
- 注意事项:
- 避免多次离心(防止干细胞特性丢失)
- 传代后48小时内观察成骨标志物表达
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30min → - 20℃ 1h → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:成骨诱导21天进行ALP染色或茜素红矿化结节检测
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 7日内证实支原体/真菌污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞活性低于85%(流式细胞仪检测结果)
- 表面标志物CD90/CD105表达不符合标准
- 不予重发情形:
- 客户解冻后超72小时未贴壁即判定死亡
- 自行更换培养基导致分化异常
- 未按规范进行成骨诱导验证实验
- 液氮保存设备故障导致反复冻融