一、细胞基本属性
1. 细胞名称：小鼠椎体终板软骨细胞（Mouse Intervertebral Endplate Chondrocytes）
2. 细胞别称：MIVC；椎体终板软骨细胞；椎体软骨细胞
3. 种属来源：小鼠（Mus musculus）
4. 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无脊柱疾病史）
5. 组织来源：椎体终板软骨组织（分离自腰椎或胸椎终板）
6. 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
7. 细胞形态：典型多边形或圆形，单层贴壁后呈铺路石样排列，可形成软骨基质结节
8. 细胞代数：P2 - P5（维持软骨细胞表型稳定性，避免去分化）
9. 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：软骨细胞专用培养基（含2% FBS+10ng/mL TGF - β1+抗坏血酸+ITS添加剂）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：~72 - 96小时（与传代次数及基质微环境相关）
14. 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或体内植入实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后弃冻存液，加入预热培养基重悬接种
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，移入培养箱静置4小时恢复贴壁
2. 传代标准：细胞融合度达80%-90%（通常每5 - 7天传代一次）
3. 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶+0.1%胶原酶II型混合消化液
- 37℃消化5 - 10分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
5. 注意事项
- 避免机械刮取损伤细胞（建议酶消化法）
- 传代后48小时内避免换液以维持细胞黏附稳定性
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS+软骨基质保护剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥85%）
- 功能验证：甲苯胺蓝染色（验证蛋白聚糖分泌）或II型胶原免疫荧光检测
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供液氮罐温度记录）
- 5天内证实细菌/真菌污染（需提供微生物检测报告）
- 细胞存活率低于85%（台盼蓝染色法）
- 胶原蛋白分泌功能检测不达标（需提供定量数据）
2. 不予重发情形
- 客户未按推荐传代次数导致细胞去分化
- 使用非胶原包被培养器皿影响贴壁效率
- 未定期检测细胞外基质导致实验数据异常
- 自行改良培养基配方未提前报备
3. 本产品符合ISO细胞培养质量标准，提供STR鉴定报告及支原体检测阴性证明
