一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠肌腱成纤维细胞
- 细胞别称：Tendon Fibroblasts；肌腱细胞；成纤维样细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，品系为C57BL/6J）
- 组织来源：肌腱组织（经胶原酶消化法分离纯化）
- 生长特性：贴壁生长（需明胶或纤维连接蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：典型长梭形或纺锤形，单层贴壁时呈平行或放射状排列
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性及遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS + 1%青霉素/链霉素+2mM L -谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖细胞密度及培养条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱4小时适应环境
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含酚红指示剂）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍培养瓶促使细胞脱落
- 注意事项：
- 消化后需加入含血清培养基完全中和酶活性
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵-1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：Ⅰ型胶原分泌检测（P4代细胞应维持基质合成能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 7日内证实微生物污染（需提供污染检测结果）
- 细胞存活率低于85%（经台盼蓝染色确认）
- 免疫荧光鉴定标志物（Vimentin、Collagen I）表达异常
- 不予重发情形：
- 客户未按推荐条件进行原代培养
- 使用非标准消化程序导致细胞损伤
- 冻存管未经梯度降温直接投入液氮
- 未定期检测支原体导致交叉污染
