一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠膈肌细胞（Mouse Diaphragm Muscle Cells）
- 细胞别称：膈肌原代细胞；膈肌肌细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体无特定病原体感染史）
- 组织来源：膈肌组织（分离自膈肌纤维束）
- 生长特性：贴壁生长（需基质包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或多角形，融合后呈平行排列
- 细胞代数：原代细胞（P0 - P3，推荐使用前3代以保证功能活性）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：高糖DMEM + 10% FBS + 2mM L - 谷氨酰胺+1%双抗
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖能力：原代细胞增殖有限（传代次数≤3次）
- 应用范围：仅限体外研究，适用于肌肉生理学、代谢研究及药物毒性测试
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱1小时恢复。
- 传代标准：细胞密度达80% - 90%（原代细胞建议尽早传代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶-EDTA溶液（含0.1%胶原酶）。
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞脱离。
- 注意事项：
- 避免机械损伤（肌细胞膜脆性较高）。
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS）
- 冻存密度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后缓慢加入冻存液重悬。
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存。
- 复苏验证：
- 存活率≥85%（台盼蓝染色法）。
- 功能验证：肌管形成实验（接种3天后可见融合趋势）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 干冰运输失效导致细胞死亡（需提供物流温度记录）。
- 48小时内证实微生物污染（需提供检测结果）。
- 细胞复苏存活率低于85%。
- 种属鉴定不匹配（STR检测报告）。
- 不予重发情形：
- 解冻后超72小时未进行贴壁培养。
- 使用非推荐消化酶导致细胞碎裂。
- 未按规范进行胶原酶辅助消化。
- 未定期检测肌细胞分化标志物（如MyoD1）。
（注：以上内容均基于标准操作流程，实际培养效果可能受实验条件影响，建议首次使用时联系技术支持获取个性化方案。）
