一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠脂肪干细胞(Mouse Adipose - Derived Stem Cells)
- 细胞别称:ADSC;脂肪来源间充质干细胞;脂肪基质细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无代谢性疾病史)
- 组织来源:腹股沟或附睾脂肪垫(皮下白色脂肪组织)
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质包被)
- 细胞形态:长梭形或多角形,单层排列呈漩涡状
- 细胞代数:P3 - P8(维持干细胞多向分化潜能与基因组稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:间充质干细胞专用培养基(含10% FBS+成纤维生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(依赖传代密度与生长因子浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或体内移植实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时稳定
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含1 mM钙离子)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免剧烈吹打(防止细胞膜表面标志物脱落)
- 首次换液需在接种后12小时内完成(清除残余红细胞)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心后轻柔重悬细胞于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→转入液氮气相层
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(应≥85%)
- 功能验证:成脂/成骨诱导分化实验(P5代细胞应保持多向分化能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供液氮罐温度记录)
- 5日内证实支原体污染(需提供荧光染色检测结果)
- 细胞增殖能力丧失(需提供连续3天生长曲线数据)
- 表面标志物CD29/CD90表达率低于90%
- 不予重发情形:
- 解冻后未按时换液导致细胞分化
- 使用非贴壁培养容器改变细胞特性
- 未按规范进行传代(融合度长期低于70%)
- 诱导分化实验中未设置阳性对照组
(注:所有实验操作需符合《国际干细胞研究学会指南》伦理规范)