一、细胞基本属性
1. 细胞名称:小鼠外根鞘细胞(Mouse Outer Root Sheath Cells)
2. 细胞别称:ORSC;毛囊外根鞘细胞;毛囊干细胞
3. 种属来源:小鼠(Mus musculus)
4. 年龄性别:6 - 8周龄健康小鼠(性别不限,供体筛选无皮肤病或脱毛史)
5. 组织来源:毛囊外根鞘组织(分离自触须毛囊或背部皮肤毛囊)
6. 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被的基质表面)
7. 细胞形态:不规则梭形或扁平铺展状,增殖期呈现簇状聚集
8. 细胞代数:P3 - P6(维持毛囊干细胞特性及分化潜能)
9. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS、表皮生长因子及肝素添加剂)
11. 培养条件:气相:5%CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及海藻糖保护剂),-150℃以下长期保存
13. 倍增时间:~48 - 60小时(依赖细胞密度及生长因子浓度)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或活体移植实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面后直接置于37℃培养箱静置4小时
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3天观察一次生长状态)
3. 传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶辅助消化)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱落
5. 注意事项
- 避免长时间消化(防止细胞膜完整性受损)
- 传代后12小时补充新鲜培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
2. 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 消化后离心去上清,缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮长期储存
4. 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞活性(台盼蓝染色存活率≥90%)
- 功能验证:免疫荧光染色鉴定KRT15或CD34标记表达
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 72小时内证实真菌或支原体污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏后细胞贴壁率低于80%(需提供显微成像证据)
- 基因型鉴定与描述不符(需提供STR比对结果)
2. 不予重发情形
- 未按说明书要求进行预包被基质处理
- 自行更改培养基配方导致细胞分化异常
- 解冻后未及时传代导致细胞过度老化
- 实验操作污染未及时反馈(超过7天申诉期)