一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠真皮毛乳头细胞(Mouse Dermal Papilla Cells)
细胞别称:DPC;毛囊真皮乳头细胞;毛乳头间充质细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别可指定,供体筛选无皮肤病及脱毛史)
组织来源:真皮层毛囊球部毛乳头组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:梭形或多突状,汇合后呈放射状排列
细胞代数:P3 - P6(保持毛囊诱导活性与形态特征)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12+10% FBS+2mM L -谷氨酰胺+10ng/mL bFGF
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含5% DMSO及海藻糖),液氮长期保存
倍增时间:约48 - 60小时(与毛囊周期活性相关)
供应限制:仅用于基础研究,不可用于体内移植或商业开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置4小时待细胞贴壁后换液
传代标准:融合度达70% - 80%(高密度易丧失毛囊诱导能力)
传代比例:1:2分瓶(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.1%胶原酶IV)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
- 避免频繁传代(P6后毛发诱导能力显著下降)
- 维持培养基碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)活性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含5% DMSO+1% BSA+10%蔗糖)
细胞密度:冻存浓度8×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后程序降温
- 梯度冷冻:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 12h → 液氮储存
复苏验证:
- 复苏后12小时检测细胞贴壁率(≥85%)
- 功能验证:qPCR检测α - SMA和Versican表达(P3代应维持特征标志物)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控截图)
2. 到货48小时内检测出微生物污染(需提供无菌检测报告)
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微照片)
4. 免疫荧光鉴定标志物缺失
不予重发情形:
1. 未使用指定胶原包被培养皿导致细胞贴壁失败
2. 自行修改培养基配方引发细胞特性改变
3. 超过推荐代数(P6)后使用导致的性能下降
4. 未按要求进行毛囊球体形成实验验证功能