一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠脂肪微血管内皮细胞（Mouse Adipose Microvascular Endothelial Cells）
- 细胞别称：MAMEC；脂肪微血管内皮细胞；脂肪内皮细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无代谢性疾病史）
- 组织来源：脂肪组织微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖基质胶包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺展呈鹅卵石样，接触抑制后呈现规则多边形
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性和遗传一致性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Endothelial Cell Growth Medium（含5% FBS及内皮细胞特异性添加物）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（与培养密度和基质条件相关）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床或动物体内实验。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预温培养基轻柔混匀离心后接种。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后，静置于培养箱中平衡1 - 2小时。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每3 - 4天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度为4×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（不含Ca²⁺/Mg²⁺）。
- 37℃消化1 - 2分钟，显微镜下观察细胞边缘收缩后立即加入含血清培养基终止。
- 注意事项：
- 避免消化过度导致细胞膜损伤。
- 传代后12 - 24小时更换新鲜培养基以清除残余消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时内台盼蓝染色检测存活率（≥90%为合格标准）。
- 功能验证：血管形成实验（P5代细胞需保持体外成管能力）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽或温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）。
- 收到细胞3天内证实细菌/支原体污染（需提供第三方检测报告）。
- 复苏后细胞存活率低于90%（台盼蓝染色结果需同步提交）。
- 细胞种属鉴定与描述不符（需提供STR检测结果）。
- 不予重发情形：
- 客户未在48小时内完成细胞复苏操作。
- 使用非指定培养基或未按规范添加生长因子。
- 因反复冻融或操作不当导致的细胞损伤。
- 未进行污染检测直接用于实验导致结果异常。
