一、细胞基本属性
细胞名称：小鼠角质形成细胞（Mouse Keratinocytes）
细胞别称：表皮角质细胞；皮肤角质形成细胞
种属来源：小鼠（Mus musculus）
年龄性别：健康成年鼠（性别不限，无皮肤病模型背景）
组织来源：表皮基底层及毛囊周围组织
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
细胞形态：铺路石样单层排列，高核质比，接触抑制后呈扁平多边形
细胞代数：P3 - P6（确保增殖活性及分化潜能）
细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用无血清冻存液）
培养基：无血清角质形成细胞培养基（含0.05mM Ca²⁺+表皮生长因子添加剂）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无动物成分冻存液（含5% DMSO及海藻糖保护剂），液氮长期保存
倍增时间：约36 - 48小时（依赖钙离子浓度及生长因子补充）
供应限制：仅用于体外研究，不可用于活体移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴轻柔摇晃解冻，加入预热的完全培养基离心去冻存液
培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡1小时
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（避免过度融合导致自发分化）
传代比例：1:3至1:4（建议接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25% Trypsin - EDTA（含1mM EDTA）
37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱离
注意事项：
消化终止需使用含血清培养基或胰酶抑制剂
维持培养基钙离子浓度≤0.1mM以抑制过早分化
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含5% DMSO+10% FBS替代物）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵-1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
消化后细胞经梯度离心去除残余胰酶
程序降温：4℃平衡30分钟 → -80℃冷冻盒过夜 → 液氮长期储存
复苏验证：
复苏后48小时内进行活率检测（台盼蓝拒染率≥85%）
功能验证：角蛋白K14免疫荧光染色（P3代细胞阳性率＞95%）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度曲线）
2. 到货48小时内经qPCR证实微生物污染
3. 复苏后活率低于80%（需提供台盼蓝染色视频记录）
4. 细胞角蛋白表达阴性（需提供免疫荧光原始数据）
不予重发情形：
1. 使用高钙培养基（＞0.1mM）导致分化异常
2. 未按规范进行胶原包被直接接种
3. 传代时机械刮取替代胰酶消化
4. 超过建议代数（P6）后出现的功能衰退
