一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠皮肤成纤维细胞（Mouse Skin Fibroblasts）
- 细胞别称：皮肤成纤维细胞；Dermal Fibroblasts；MSF
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成鼠（性别不限，供体筛选无皮肤疾病史）
- 组织来源：皮肤真皮层组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：典型长梭形或纺锤状，融合后呈平行排列或漩涡状
- 细胞代数：P3 - P8（确保增殖活性与功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS+1%双抗+2mM L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖血清浓度及接种密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍培养瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 消化终止时需加入等体积含血清培养基
- 传代后48小时内避免频繁观察以降低机械扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集对数生长期细胞，缓慢滴加冻存液重悬
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测细胞贴壁率（应≥85%）
- 功能验证：Ⅰ型胶原分泌检测（P5代细胞应维持基质合成能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控截图）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
- 细胞复苏存活率低于85%（台盼蓝染色法定量）
- 种属鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形：
- 未按规范进行预包被处理导致细胞贴壁失败
- 自行修改培养基配方引发细胞状态异常
- 解冻后未立即使用导致二次冻存损伤
- 实验操作污染未及时反馈
