一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠破骨细胞(Mouse Osteoclasts)
- 细胞别称:OC;破骨前体细胞;多核骨吸收细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:6 - 8周健康小鼠(性别可选,供体无骨骼代谢疾病史)
- 组织来源:骨髓单核细胞诱导分化或RAW264.7细胞系诱导
- 生长特性:半贴壁生长(依赖RANKL与M - CSF诱导分化)
- 细胞形态:多核巨细胞样,边缘呈伪足状,TRAP染色阳性
- 细胞代数:原代细胞(P0)或诱导分化后P1 - P3代
- 细胞规格:1×10^5 cells/冻存管(含无血清冻存液)或预诱导细胞悬液
- 培养基:α - MEM培养基(含10% FBS+30 ng/mL RANKL+25 ng/mL M - CSF)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),- 150℃以下长期保存
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预诱导培养基;预诱导悬液:直接加入RANKL/M - CSF继续诱导培养
- 传代标准:原代细胞不推荐传代;RAW264.7诱导后细胞完成融合即可终止
- 分化方法:使用含RANKL(30 ng/mL)和M - CSF(25 ng/mL)的培养基诱导5 - 7天
- 注意事项:避免频繁换液导致诱导因子浓度波动,分化期间每3天半量换液
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL(多核细胞需轻柔吹打分散)
- 冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液,直接转入程序降温盒(- 80℃过夜后转液氮)
- 复苏验证:复苏后72小时内进行TRAP染色鉴定多核形态,骨片吸收实验验证功能活性
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明);2. 7天内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测证据);3. 诱导分化后TRAP阳性率低于80%(需提供染色结果)
- 不予重发情形:1. 未按推荐浓度添加RANKL/M - CSF导致分化失败;2. 使用非专用培养基或擅自更改诱导方案;3. 超过推荐代次导致功能丧失;4. 未进行无菌操作引发污染