一、细胞基本属性
细胞名称：小鼠髓核细胞
细胞别称：髓核原代细胞；椎间盘髓核细胞
种属来源：小鼠（Mus musculus）
年龄性别：健康成鼠（8周龄，性别不限，供体筛选无脊椎退变史）
组织来源：椎间盘髓核组织（经解剖分离获取）
生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：类圆形或多角形，胞质透亮呈软骨细胞样特征
细胞代数：P2 - P5（维持细胞外基质分泌功能）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基：DMEM/F12+10% FBS+1% ITS+50μg/mL抗坏血酸
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含5% DMSO及海藻糖），液氮长期保存
倍增时间：约72 - 96小时（与细胞活性及传代次数相关）
供应限制：仅限基础研究使用，不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后，1200rpm离心3分钟，弃上清后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭外壁，静置培养箱4小时后再观察贴壁情况
传代标准：融合度达80% - 90%（建议每周传代1次）
传代比例：1:1至1:2（初始接种密度建议3×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胶原酶II消化30分钟，辅以0.05%胰酶短时处理
- 37℃消化全程振荡监测，细胞团离散后立即终止
注意事项：
- 消化后需离心去除酶残留
- 首次换液需在接种48小时后进行
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含5% DMSO及0.1M海藻糖）
细胞密度：冻存浓度1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 消化后细胞经离心收集，轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮气相长期存储
复苏验证：
- 复苏后48小时检测Aggrecan基因表达（qPCR验证）
- 存活率标准：台盼蓝拒染率≥85%
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供运输温度曲线）
2. 到货7日内经PCR证实支原体污染
3. 细胞复苏后Aggrecan免疫荧光检测阴性
4. 细胞种属鉴定结果不符
不予重发情形：
1. 使用非胶原包被培养器皿导致贴壁失败
2. 擅自添加TGF - β等因子干预细胞表型
3. 超过推荐代数（P5）继续扩增导致的功能丧失
4. 未按规范进行细胞外基质染色鉴定
（注：本产品需配合专用包被试剂盒使用，操作前请详阅技术手册）
