一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠纤维环细胞（Mouse Fibroannulus Cells）
- 细胞别称：Fibroannulus Cells；椎间盘纤维环细胞；纤维软骨细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无脊柱疾病史）
- 组织来源：椎间盘纤维环组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或星形，贴壁伸展后呈网状排列
- 细胞代数：P3 - P8（保证细胞外基质分泌功能稳定）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：高葡萄糖DMEM（含10% FBS+纤维软骨细胞专用生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及渗透保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~72 - 96小时（依赖细胞密度与培养环境）
- 供应限制：仅限基础研究使用，不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每4 - 5天传代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 消化过程需轻柔吹打避免机械损伤
- 首次传代后48小时需全量换液促进基质分泌
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 4℃预冷冻存管，细胞悬液分装后立即进行程序降温
- 梯度冷冻：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 12小时 → 液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时进行活率检测（台盼蓝染色法≥90%）
- 功能验证：Ⅱ型胶原免疫荧光染色（P5代细胞应保持分泌能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控报告）
- 到货7日内确认微生物污染（需提供第三方检测报告）
- 细胞贴壁率低于80%（需提供接种后24小时形态学照片）
- 种属鉴定结果与标识不符
- 不予重发情形：
- 未使用指定浓度胶原包被培养皿导致贴壁失败
- 自行更改培养基配方影响细胞特性
- 解冻后未及时接种超过4小时
- 未按要求进行定期传代导致细胞老化
