一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠骨骼肌成纤维细胞(Mouse Skeletal Muscle Fibroblasts)
- 细胞别称:骨骼肌基质细胞;肌成纤维细胞;SMF
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体无肌肉病变史)
- 组织来源:骨骼肌组织(经胶原酶消化分离)
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质黏附)
- 细胞形态:长梭形或星状不规则三角形,增殖期呈放射状排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性及遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(受培养密度及血清浓度影响)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒外壁后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 消化终止时添加含血清培养基中和酶活性
- 避免频繁观察扰动细胞贴壁过程
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%培养基)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 细胞悬液与冻存液按1:1混合
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(应≥85%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认肌成纤维特性
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
- 7天内证实支原体污染(需提供检测报告)
- 复苏后存活率低于80%(台盼蓝染色法)
- 细胞形态或标志物表达与描述不符
- 不予重发情形
- 解冻后超72小时未进行贴壁培养
- 使用非推荐培养基或添加剂导致功能异常
- 未按标准流程进行传代或冻存操作
- 未定期检测支原体引发交叉污染
(注:所有操作需符合生物安全规范,细胞特性可能因实验条件存在个体差异)